北平近郊农村姑娘佟大香（李萌饰），因生计无着落，与妈妈进城借住于舅妈家。最初母女二人以替人缝洗衣服度日，邻居尚幼林（李纬饰）对大香百般照顾，两人渐生情愫。但舅妈为了钱财，与流氓马三（石挥饰）勾结，以去袜子厂做工为名，将大香骗卖到崔胡子和胭脂虎（崔超明、李凌云分饰）开设的妓院“同喜院”。在妓院中，崔胡子和胭脂虎常常因为接客数量过少而打罚妓女们，同时一些妓女在卖淫过程中染上了性病，却得不到良好的医治。在一次巡官来妓院查验捐照时，大香不堪忍受，向巡官寻求帮助。但巡官收到崔胡子和胭脂虎的贿赂，反倒助纣为虐。大香也因此遭到更大迫害，其母亦投河身亡。在多方打听后，尚幼林找到了这家妓院，并拿出母亲遗留的积蓄希望帮大香赎身。但在交钱之后，妓院并不放人，而尚幼林也遭到了毒打。大香萌生死意，但被妓院姐妹发现，其性命得保。
中国共产党即将接收北平，胭脂虎称“共产党说妓女是废物”，会把她们送去配给给伤残大兵或者去前线踩地雷等。1949年11月21日，妓院被查封，大香与姐妹们随后住进了妇女生产教养院，成为“学员”，开始新生活。秋香也成为教养院的分组组长。教养院的同志对妓女们进行思想改造，并帮助她们治疗性病，如同亲姐妹一般。但由于胭脂虎的言论加之过去的经历，大香与姐妹们起初并不信任教养院和政府。但在同志们的感化之下，大香与姐妹们渐渐领会了政府的好意。而崔胡子和胭脂虎等人也得到了政府惩办。大香等姐妹们终于站起来成为了自食其力的劳动者。[1]
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1949年11月21日，北京市公安局决定突击查封全市妓院。全部妓院在12小时以内被封闭，从业妓女被送往北京市妇女生产教养院，成为“学员”，开始新生活。
《姊姊妹妹站起来》于1951年由文华影业公司在上海摄制，其编导为陈西禾，摄影为葛伟卿。陈西禾认为妓女改造可以表现“新旧世界是怎样的不同”的这一题材，于是决定拍摄电影《姊姊妹妹站起来》。为求真实，陈西禾前往北京采访收集素材，他大胆起用业余演员，请教养院的学员李凌云出演片中的老鸨，增加了影片的真实感。
影片上映以后，许多地区学习片中经验，开始处理当地的娼妓现象。上海市妇女教养所则组织妓女观看这部电影，引导她们找到沦为娼妓的原因，从而控诉妓院主。
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